在生命科學研究和藥物開發(fā)領域，對細胞增殖和毒性進行快速、準確的定量分析是至關重要的基礎實驗。傳統(tǒng)的檢測方法往往操作繁瑣、靈敏度有限或具有放射性風險。CCK-8試劑盒（Cell Counting Kit-8）的出現(xiàn)，以其高靈敏度、操作簡便和安全無毒的顯著優(yōu)勢，迅速成為全球?qū)嶒炇覐V泛采用的細胞活性檢測工具，極大地推動了細胞生物學、腫瘤學和藥理學等領域的研究進程。
CCK-8試劑盒的核心是一種名為WST-8的水溶性四唑鹽。其檢測原理巧妙地利用了活細胞線粒體中脫氫酶的催化作用。在活細胞中，WST-8能被這些脫氫酶還原生成一種橙黃色的水溶性甲臜產(chǎn)物。該產(chǎn)物的生成量與活細胞的數(shù)量成正比，因此通過酶標儀在450nm波長處測定其吸光度（OD值），即可間接反映細胞的增殖活性或存活率。由于甲臜產(chǎn)物是水溶性的，無需像傳統(tǒng)的MTT法那樣進行溶解步驟，避免了因結(jié)晶溶解不充分帶來的誤差，使檢測過程更加簡便、結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。
CCK-8試劑盒的優(yōu)勢體現(xiàn)在多個方面。首先是高的靈敏度，其檢測下限遠低于MTT等方法，尤其適用于低密度細胞的檢測。其次是操作流程的簡化，整個檢測過程僅需一步——將CCK-8試劑直接加入細胞培養(yǎng)孔中，孵育1-4小時后即可讀數(shù)，無需換液，也無需添加任何有機溶劑。這不僅大大縮短了實驗時間，也減少了對細胞的干擾，保證了檢測結(jié)果的準確性。此外，WST-8對細胞毒性極低，檢測完成后細胞仍可繼續(xù)培養(yǎng)用于其他實驗，實現(xiàn)了珍貴樣本的再利用。最重要的是，CCK-8不含放射性物質(zhì)，對實驗人員和環(huán)境均安全無害，符合現(xiàn)代實驗室的安全要求。
在藥物篩選中，它是評估候選藥物對腫瘤細胞或其他靶細胞抑制或殺傷效應的核心工具，能夠快速繪制劑量-效應曲線，計算半數(shù)抑制濃度（IC50）。在細胞生物學研究中，它被用于測定細胞因子、生長因子等生物活性分子對細胞增殖的影響。在毒理學評價中，CCK-8可用于檢測化學物質(zhì)、環(huán)境污染物或納米材料對細胞的毒性作用。此外，它在細胞增殖動力學研究、血清學檢測以及細胞耐藥性分析等方面也發(fā)揮著重要作用。
更新時間：2025-10-16
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