產(chǎn)品描述

G418 Sulfate (G418硫酸鹽)，也稱(chēng)作Geneticin (遺傳霉素)、G418、G 418或者G-418，是一種結(jié)構(gòu)類(lèi)似于B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷類(lèi)抗生素，來(lái)源于Micromonospora rhodorangea，常用于篩選表達(dá)neo基因的真核或原核多克隆或單克隆細(xì)胞。G418不僅用于穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選，也用于穩(wěn)定細(xì)胞株的維持。本產(chǎn)品的50mg/ml包裝經(jīng)過(guò)過(guò)濾除菌，可以直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。

在細(xì)菌、酵母、原生動(dòng)物、蠕蟲(chóng)、高等植物和哺乳動(dòng)物中，遺傳霉素通過(guò)抑制蛋白合成而抑制或殺死細(xì)胞。其作用機(jī)制為遺傳霉素能夠與70S和80S核糖體結(jié)合，從而阻斷肽鏈延伸，干擾蛋白合成。其抗性基因(主要為neo基因)位于轉(zhuǎn)座子Tn601 (903)或Tn5(來(lái)源于細(xì)菌)，可以在真核細(xì)胞中表達(dá)。通過(guò)基因重組技術(shù)將這些抗性基因?qū)爰?xì)胞，使細(xì)胞表達(dá)抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶(amino-glycoside 3’-phosphotransferase, APH(3)II)，從而獲得對(duì)G418的耐藥性，用來(lái)篩選和維持培養(yǎng)攜帶抗性基因的原核或者真核細(xì)胞。

哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，當(dāng)抗性基因neo被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組后 ,編碼表達(dá)氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶(amino-glycoside 3’-phosphotransferase, APH(3)II)。此酶通過(guò)共價(jià)修飾G418的氨基或羥基功能，抑制抗生素-核糖體間的相互作用，從而使得抗生素失活。這一特性賦予細(xì)胞產(chǎn)生抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。進(jìn)行穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株篩選實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要建立劑量反應(yīng)曲線(dose-response curve or kill curve)確定殺死無(wú)抗性細(xì)胞的有效濃度。

植物細(xì)胞中，通過(guò)轉(zhuǎn)染攜帶nptII基因的抗性質(zhì)粒孵育其抗性。nptII基因也能編碼表達(dá)氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶，這個(gè)酶使得多種抗生素喪失活性，包括 G418，和。

G 418與同為氨基糖苷類(lèi)抗生素，都可被Neo基因產(chǎn)物失活，因此都可以用于篩選攜帶Neo抗性基因的細(xì)胞，篩選的細(xì)胞都可以用G418替代。

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸與保存

常溫運(yùn)輸。4℃保存，有效期36個(gè)月。 

本產(chǎn)品于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。